Ujian ELISA adalah pemeriksaan perubatan makmal, semasa pelaksanaan reaksi yang disebut antigen-antibodi. Antigen yang berbeza dapat diuji yang berperanan dalam perubatan manusia atau veterinar. Hanya institusi makmal bertauliah yang ditugaskan untuk melakukan ujian di Jerman.
Apa itu prosedur?
Dalam pemeriksaan perubatan makmal, ujian ELISA termasuk prosedur imunologi yang disebut. Melalui prosedur ujian, protein molekul dapat dikesan dengan agak berbeza cecair badan. ELISA adalah singkatan untuk Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay. Oleh itu, ini adalah sebutan bahasa Inggeris yang, bagaimanapun, telah mapan dalam penggunaan perubatan Jerman. Ujian ELISA tergolong dalam prosedur imunologi yang disebut dalam pemeriksaan perubatan makmal. Prosedur ujian boleh digunakan untuk mengesan protein molekul dalam pelbagai jenis cecair badan. Pengesanan ini molekul seterusnya membolehkan kesimpulan dibuat mengenai penyakit tertentu atau gambar klinikal, sebab itulah doktor juga membuat diagnosis mereka bergantung pada hasil ujian ELISA tersebut. Oleh itu, prosedur ujian sangat penting dalam amalan klinikal setiap hari, sama ada dalam keadaan pesakit luar atau pesakit dalam. Yang sepadan cecair badan, sebagai contoh keseluruhan darah atau cecair dari sendi, dihantar ke makmal sebaik sahaja dikumpulkan dari pesakit. Ini biasanya merupakan contoh yang sangat mendesak, kerana bahan asli dianggap sensitif dan harus diperiksa secepat mungkin. Sampel yang disebut terlalu banyak boleh membawa kepada keputusan negatif palsu kerana patologi protein untuk dikesan telah dikurangkan atau diturunkan sepenuhnya sementara itu. Oleh itu, apa yang disebut preanalytics memainkan peranan penting dalam ELISA; hasil yang mencurigakan atau negatif harus diulang lagi sekiranya terdapat gejala klinikal yang sesuai.
Fungsi, kesan, dan tujuan
Untuk prestasi ujian yang betul di makmal perubatan yang terakreditasi, tabung uji dan plat microtiter yang disebut sangat diperlukan. Plat ini dengan lekukan separa cekung halus diperbuat daripada plastik khas dan masing-masing dilapisi dengan antibodi yang sangat spesifik. Sekiranya antigen yang akan dikesan ada di dalam cairan tubuh yang akan diperiksa, maka reaksi antigen-antibodi spesifik berlaku sesuai dengan prinsip kunci-dan-kunci yang disebut. Bahan sampel boleh dimasukkan ke dalam piring sama ada secara manual oleh kakitangan makmal menggunakan pipet atau secara automatik sepenuhnya. Di institusi perubatan makmal moden, hanya sistem automatik sepenuhnya yang digunakan untuk diagnostik ELISA. Walau bagaimanapun, ini mesti dipantau oleh kakitangan terlatih, pembantu makmal perubatan-teknikal. Kawalan kualiti dalaman dan luaran yang disebut juga menjadi tanggungjawab kakitangan makmal, lebih tinggi daripada kakitangan perubatan untuk perubatan makmal, penyakit berjangkit epidemiologi dan mikrobiologi. Setelah kumpulan ujian pertama, iaitu setelah bahan dimasukkan ke dalam plat, antigen spesifik dalam sampel, jika ada, sudah terikat pada antibodi di pinggan plastik. Cuci dengan garam fisiologi kemudian dilakukan untuk menghilangkan faktor gangguan seperti antigen yang tidak diingini atau protein dari penyediaan. Langkah ini sangat penting untuk mengelakkan reaksi positif yang salah. Hasil positif palsu yang ditafsirkan oleh makmal boleh membawa akibat yang membawa maut kepada pesakit. Pada langkah kedua ujian, antibodi lain ditambahkan yang digabungkan dengan enzim. Antibodi berlabel ini juga mengikat antigen. Pada langkah ketiga dan terakhir, pewarna khas ditambahkan dalam jumlah yang ditentukan, yang terdegradasi ke tahap yang lebih besar atau lebih sedikit oleh sisa enzim yang masih ada. Hanya enzim tersebut yang dapat terdegradasi, yang sebelumnya tidak terikat dengan antigen bersama dengan antibodi. Enzim bebas mampu memecahkan pewarna tambahan. Jumlah tepat pewarna yang dibelah dapat ditentukan dengan tepat dengan kaedah makmal lain, yang disebut fotometri. Ini memungkinkan kesimpulan yang tepat untuk dibuat sama ada antigen ada dalam bahan sampel sama sekali dan, jika demikian, berapa banyak. Ujian ELISA digunakan bukan hanya untuk diagnosis awal atau untuk mengesahkan diagnosis yang disyaki penyakit tertentu dan gambar klinikal, tetapi juga untuk memantau kemajuan mereka. Sekiranya antigen kepekatan dalam ujian menjadi lebih rendah sepanjang tahun terapi, terapi itu dianggap berjaya.
Risiko, kesan sampingan, dan bahaya
Ujian ELISA memperoleh nilai informatifnya terutamanya melalui pengesanan struktur antigen dalam cecair badan. Ujian ini membolehkan penyataan yang disebut kualitatif, tetapi juga semi-kuantitatif dan kuantitatif mengenai disyaki kehadiran antigen tertentu dalam cecair badan. Keseluruhan darah tidak boleh digunakan untuk ujian, hanya serum darah. Ujian langsung pada pesakit, misalnya dari kapilari darah daripada hujung jariOleh itu, seperti beberapa ujian serologi lain, tidak mungkin setakat ini. Dalam perubatan manusia, ujian ELISA digunakan terutamanya untuk mengesan antigen pada jangkitan bakteria, virus atau kulat. Di samping itu, semua hasil positif dari hepatitis serologi diperiksa lagi dengan ujian ELISA sebagai standard. Yang pasti hormon, contohnya mengandung hormon HCG, juga dapat ditentukan dengan ujian ELISA. Sekiranya komplikasi tertentu berlaku semasa mengandung, pengetahuan tepat mengenai kepekatan hormon kehamilan dalam darah sangat membantu dalam diagnostik dan terapi. Petunjuk lain untuk ujian ini adalah pengesanan paraprotein yang disebut dalam air kencing, kerana ia berlaku, misalnya, dalam pelbagai penyakit ketumbuhan, seperti pelbagai myeloma. Ujian ELISA masih dilakukan di banyak makmal hari ini, tetapi dianggap ketinggalan zaman oleh pakar. Reaksi imun bergabung dengan enzim dalam ujian ELISA semakin diganti dalam beberapa tahun kebelakangan ini dengan label radioaktif antibodi, yang memberikan hasil pengukuran kuantitatif yang lebih baik. Ujian ini juga dipanggil RIA, Radio Immunabsorbent Assay. Kemajuan khusus ELISA yang lain adalah kaedah kimia ringan seperti cahaya atau pendarfluor.
