Bujang-gen analisis adalah kaedah ujian genetik yang disasarkan.
Dalam kerangka prosedur ini, jika penyakit keturunan dicurigai, yang dipicu oleh satu perubahan pada a gen, gen yang disyaki sebagai kausal diperiksa. Ini juga sering dilakukan secara rutin sebagai bagian dari pemeriksaan saringan.
Petunjuk (bidang permohonan)
- Diagnosis penyakit monogenik misalnya Sistik Fibrosis.
Prosedur
Bahan diperlukan
- Darah Heparin (minimum 1-2 ml)
Persiapan pesakit
- Tidak perlu
Faktor gangguan
- Tidak diketahui
Kaedah makmal
Selalunya, kaedah penjujukan yang digunakan dalamgen analisis adalah kaedah Sanger, juga disebut sintesis penamatan rantai, di mana pertama kali datang ke pengasingan DNA dari darah. Kemudian, semua hidrogen ikatan yang berfungsi untuk menahan DNA dua helai itu terputus. Selepas pemanasan pada suhu 94-96 ° C selama satu minit, terdapat dua helai tunggal. Seterusnya, yang disebut hibridisasi primer berlaku, di mana primer dilampirkan. Ini berlaku pada suhu sekitar 60 ° C. Primer adalah oligonukleotida (oligomer yang terdiri daripada beberapa nukleotida) yang berfungsi sebagai titik permulaan untuk mereplikasi DNA enzim seperti DNA polimerase. Selepas hibridisasi primer, peluasan berlaku, di mana suhu dinaikkan hingga 72 ° C. Ini membolehkan primer melekat pada DNA polimerase (enzim yang mensintesis DNA). Setelah rata-rata 30 kitaran, prosedur dapat dihentikan.
Analisis lebih lanjut dilakukan oleh kapilari elektroforesis dalam jujukan automatik. Hasilnya dipanggil elektropherogram. Ini menunjukkan warna yang berbeza yang menunjukkan urutan asas.
Dengan kaedah ini, mutasi yang hanya melibatkan satu asas nukleik dalam gen, juga dikenal sebagai mutasi titik, dapat dikesan.
