Fluoresensi in situ hibridisasi (IKAN) adalah kaedah pemeriksaan genetik untuk mengesan DNA (asid deoksiribonukleik) dalam inti sel individu.
Kaedah ini melibatkan penggunaan probe DNA tertentu yang hanya dapat memberikan maklumat mengenai kawasan genom yang mana probe yang digunakan adalah spesifik.
Petunjuk (bidang permohonan)
- Kecurigaan penyimpangan kromosom berangka:
- Pengesanan keabnormalan kromosom berangka (contohnya, trisomi 21).
- Untuk pengukuran mozaik untuk penyimpangan kromosom (contohnya, di Ullrich-Sindrom Turner).
- Pengesanan untuk microdeletions (contohnya, monosomi 22q11.2).
- Pengesanan penyimpangan kromosom (contohnya, leukemia limfosit kronik (CLL), bukan Hodgkin limfoma).
Petunjuk di atas dianalisis oleh interphase FISH (lihat "Prosedur Makmal" untuk perinciannya).
Prosedur
Bahan diperlukan
- Darah Heparin (minimum 1-2 ml)
Persiapan pesakit
- Tidak perlu
Faktor gangguan
- Tidak diketahui
Kaedah makmal
Fluoresensi in situ hibridisasi (FISH) melibatkan penggunaan probe DNA berlabel pendarfluor (FISH probes). Ini dapat mengikat ke lokasi DNA tertentu pada kromosom, yang disebut hibridisasi. Setelah atau setelah mengikat probe berlabel fluoresen, penilaian dapat dilakukan dengan menggunakan mikroskop. Dalam proses ini, bilangan isyarat pendarfluor dalam inti interphase ditentukan. Selanjutnya, penilaian lokasi (misalnya translokasi / pergeseran lokasi / ke kromosom lain) pada metafasa kromosom adalah mungkin.
Apabila pendarfluor berbeza pewarna digunakan untuk DNA sasaran yang berbeza dalam prosedur IKAN, ia disebut sebagai IKAN multicolor. Ini membolehkan visualisasi genom lengkap.
Dalam beberapa kes, probe DNA tidak diberi label langsung dengan pewarna pendarfluor, yang disebut prosedur tidak langsung. Sebaliknya, ia dilabel dengan bahan seperti Biotin atau digoxigenin. Kaedah ini dianggap lebih rumit tetapi lebih sensitif.
