Prosedur
Sekiranya ujian langsung Coombs dilakukan, berwarna merah darah sel disaring keluar dari darah pesakit. Ia harus diuji sama ada ada antibodi jenis IgG pada mereka, yang menyebabkan anemia hemolitik atau darah ketidaksesuaian kumpulan dalam badan. Serum Coombs mengandungi antibodi terhadap antibodi IgG manusia.
Campuran dipanaskan (diinkubasi) untuk jangka masa yang lebih lama. Sekiranya ada antibodi pada warna merah darah sel, mereka akan berkumpul dan ujian akan positif. Ujian Coombs tidak langsung terdiri daripada dua bahagian.
Tujuannya adalah untuk menentukan antibodi yang terdapat secara bebas dalam darah dan tidak terikat pada sel darah. Kali ini bahagian cecair (serum) ditapis dari darah pesakit. Pertama, sel darah merah ditambahkan ke dalam serum untuk ujian.
Sekiranya terdapat antibodi bebas dalam serum, ini akan mengikat sel darah merah. Tindak balas ini tidak dapat dilihat. Hanya pada langkah kedua, seperti dalam ujian langsung Coombs, serum Coombs dengan antibodi terhadap antibodi manusia ditambahkan dan dipanaskan. Sekiranya hasilnya positif, penyelesaiannya juga terkumpul.
Penilaian
Apabila antibodi digabungkan dengan serum Cooms yang sepadan, antibodi serum (bahagian darah yang cair) mengikat dengan antibodi pesakit. Antibodi mempunyai struktur berbentuk Y, yang bermaksud bahawa mereka selalu dapat mengikat dua pasangan pengikat dan dengan itu saling menghubungkan sel darah merah antara satu sama lain. Ini menghasilkan pengumpulan sel darah yang banyak.
Gumpalan ini menjadi kelihatan - penggumpalan darah (gumpalan) dan ujiannya positif. Sekiranya pesakit tidak mempunyai antibodi, serumnya tetap cair. Tidak ada perubahan yang dapat dilihat - ujiannya negatif.
Apakah alternatifnya?
Satu alternatif kepada ujian Coombs adalah prosedur ELISA imunologi (Enzyme-Immunosorbent Assay), di mana antibodi tertentu ditandai dengan enzim. Antibodi ini ditambahkan ke dalam larutan ujian. Sekiranya antibodi berlabel bertindak balas dengan antibodi larutan ujian, enzim terikat diaktifkan dan menghasilkan pewarna.
Tabung uji yang sesuai berubah warna - ujiannya positif. Sebagai tambahan kepada prosedur ELISA, terdapat juga WESTERN-Blot, yang sering digunakan sebagai ujian pengesahan untuk ELISA positif.
